O uso da coloração de azul de toluidina como método rápido, de baixo custo e eficiente para diagnóstico da fragmentação do DNA espermático em diversas espécies
Rossi, Eduardo dos SantosNovaes, Gabriel AugustoRui, Bruno RogérioAngrimani, Daniel de Souza RamosBicudo, Luana de CássiaLosano, João Diego de AgostiniNichi, MarcilioPereira, Ricardo José Garcia
O objetivo deste estudo foi padronizar a técnica do azul de toluidina para a análise da fragmentação do DNA de espermatozoides de touro, carneiro e garanhão. Para tanto, utilizamos seis animais de cada espécie. O esperma foi coletado e as amostras foram divididas em duas alíquotas: uma amostra de espermatozoides foi mantida a 5°C (DNA de espermatozoide intacto), e as amostras remanescentes foram submetidas à indução da fragmentação do DNA. As amostras foram então misturadas para obter proporções conhecidas e progressivas de espermatozoides com DNA fragmentado (0, 25, 50, 75 e 100%). Os esfregaços de sêmen foram realizados e submetidos à coloração com TB. Observamos altos coeficientes de regressão linear entre a proporção esperada de DNA danificado e os resultados de TB para amostras de carneiro, touro e garanhão. Em conclusão, a coloração de TB foi considerada uma técnica rápida e eficaz para o estudo do DNA dos espermatozoides.(AU)
Texto completo