Eficiencia de la transgenesis murina en el institut pasteur de Montevideo
Schlapp, GeraldineGoyeneche, LuciaCárdenas-Rodriguez, MagdalenaCrispo, Martina
Los animales transgénicos son empleados en investigación biomédica para estudiar la función y regulación de los genes, como modelos de enfermedades humanas y para ensayar estrategias terapéuticas. Asimismo, la transgénesis es aplicada en animales productivos para la generación de proteínas recombinantes y la mejora animal, y para la realización de xenotrasplantes. La Unidad de Animales Transgénicos y de Experimentación del Institut Pasteur de Montevideo produce ratones transgénicos a demanda para investigadores locales y de la región. El objetivo de este trabajo es mostrar la eficiencia durante la puesta a punto de alguna de las técnicas empleadas: (i) microinyección pronuclear de ADN (Tg clásica); (ii) transgénesis mediada por lentivirus (LV); y (iii) microinyección de células madre embrionarias (ESC) en blastocistos. Los parámetros evaluados fueron: sobrevida embrionaria 30 min post-inyección, tasa de preñez, de nacimiento, de transgénesis y tasa global de transgénesis. La sobrevida embrionaria resultó en 54,6%, 78,8% y 87,8% para Tg clásica, ESC y LV, respectivamente. El número de embriones GFP (proteína verde fluorescente) + inyectados con LV resultó 42,6%. La tasa de preñez fue 54,8% y 25,0%; la tasa de nacimiento fue 21,3% y 24,0%; la tasa de transgénesis fue 4,5% y 24,1%; y la tasa de transgénesis global fue 0,2% y 0,8%, para Tg clásica y ESC, respectivamente. En suma, se produjeron 21 animales fundadores por Tg clásica, 7 animales quiméricos por inyección de ESC, y más de un 50% de embriones resultaron GFP+ con la técnica de inyección de LV. Las técnicas empleadas resultaron efectivas para obtener los modelos transgénicos solicitados. CEUA Nº 01-012.(AU)
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