Avaliação in silico e in vitro de iniciadores para a diferenciação molecular de espécies de Leishmania

Trigo, Beatriz BatistaOliveira-Rovai, Fernanda Muller deMilanesi, MarcoIto, Pier Kenji Rauschkolb KatsudaUtsunomiya, Yuri TaniLopes, Flávia LombardiPaulan, Silvana de CássiaNunes, Cáris Maroni

As leishmanioses são zoonoses causadas por mais de 20 espécies de protozoários do gênero Leishmania. As infecções são comumente disseminadas por flebotomíneos e causam um amplo espectro de manifestações clínicas. Portanto, a detecção e diferenciação de espécies de Leishmania são importantes do ponto de vista epidemiológico e terapêutico. O objetivo deste estudo foi combinar estratégias in silico e in vitro para avaliar a especificidade analítica dos primers descritos anteriormente na literatura. De acordo com a PCR eletrônica (e-PCR), 23 dos 141 pares de primers selecionados por meio de pesquisa da literatura estavam de acordo com a especificidade analítica anteriormente relatada. A avaliação in vitro de nove desses pares de primers, por PCR quantitativa (qPCR), confirmou a especificidade analítica de cinco deles ao nível de espécie de Leishmania, do complexo L. mexicana ou dos subgêneros Leishmania e Viannia. Com base nos resultados, sugere-se que a combinação de e-PCR e qPCR é uma abordagem valiosa para a validação e maximização da especificidade de novos pares de primers para o diagnóstico laboratorial de infecções com Leishmania spp.(AU)

1. diagnóstico diferencial
2. qPCR
3. Leishmaniasis
4. differential diagnosis
5. Leishmaniose
6. e-PCR