Vitrificação de embriões Mus domesticus domesticus contidos em volumes diferentes de 9, 0 M de etileno glicol
Assaf, Sabrina SilveiraRodrigues, José Luiz
Os experimentos tiveram como objetivo determinar a taxa de eclosão dos embriões vitrificados em volumes diferentes de 9,0M de etileno glicol. Simultaneamente, testaram-se dois procedimentos de estocagem dos fios de teflon, denominados caixade aço inoxidável e globete/raque. No experimento I, os 881 embriões coletados foram distribuídos em 4 tratamentos: tratamento1 (T1 = controle): 307 embriões foram cultivados in vitro em meio PBSm, acrescido de 0,4 por cento de BSA; tratamento 2 (T2): 292embriões foram expostos à solução de glicerol 10 por cento acrescida de 0,4 por cento de BSA, envasados em palhetas de 0,25 mL esubmetidos ao congelamento pelo método rápido em Biocool®; tratamento 3 (T3): 138 embriões foram expostos durante 2minutos à solução de desidratação (10 por cento de EG + 6 por cento BSA em PBSm) e então transferidos para a solução de vitrificação (50 por centode EG + 6 por cento de BSA em PBSm), onde permaneceram por 30 segundos sendo após transferidos para o volume de 1 µL nointerior de um fio de teflon, medindo 0,4mm de diâmetro, 2,0cm de comprimento e 0,05mm de espessura. Os fios foramacondicionados em uma caixa de aço inoxidável para serem armazenados em nitrogênio líquido; tratamento 4 (T4): 144 embriõesforam expostos à solução de desidratação (10 por cento de EG + 6 por cento BSA em PBSm) e após 2 minutos, foram transferidos para asolução de vitrificação (50 por cento de EG + 6 por cento BSA em PBSm), onde permaneceram por 30 segundos e foram colocados em volumede 1 µL no interior do fio de teflon. Os fios de teflon foram estocados em globetes unidos às raques e mantidos em nitrogêniolíquido. Após o aquecimento, os embriões foram cultivados em PBSm suplementado com 0,4 por cento de BSA. As taxas de eclosãoembrionária observadas foram: T1=79,80 por cento (245/307); T2=40,07 por cento (117/292); T3=39,13 por cento (54/138) e T4=25,69 por cento (37/144).No segundo experimento 747 embriões foram distribuídos em 3 tratamentos: tratamento 1 (T1= controle): 80 embriões foram...
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