Brucelose canina: obtenção de antígenos e avaliação pela técnica de imunodifusão em gel de agarose

aesinhaesinhaesinhaJosé Figueiredo, MárcioAugusto Ronconi, MarioMarques Torres, HelenitaHelena Cosendey Aquino, MariaJose Pereira Gomes, MarcosVicente Silva, MarlomAntônio Trindade Oliveira, Luiz

Cães com brucelose causada por Brucella canis apresentam poucos sinais importantes de doença sistêmica e nenhumdeles específico para brucelose. Devido às limitações dos procedimentos bacteriológicos, casos suspeitos devem ser avaliadossorologicamente. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização de antígenos externos e internos de Brucella canis e deBrucel/a ovis, pelo teste de imunodifusão em gel de agarose {IOGA). Antígenos externos e internos foram extraídos por soluçãosalina tamponada e fosfatada {PBS) a quente a partir das cepas RM 6/66 de Brucella canis e REO 198 de Brucella oviscultivadas em Ágar e Caldo Tripticase soja {Meio de Castafleda). Os antígenos externos foram obtidos após centrifugação econcentração do sobrenadante por ultrafiltração. Simultaneamente os sedimentos foram submetidos ao ultra-som ecentrifugados sendo a porção sobrenadante considerado o extrato cru sonicado de B. canis e de B. ovis {antígeno interno).Soro hiperimune anti B. canis e anti B. ovis foram obtidos por inoculação intraperitoneal em coelhos {B. canis e B. ovis ), emcadela {B. canis) e em ovelha {B. ovis) sendo utilizados como controles positivos na avaliação diagnóstica. Para referenciar osantígenos produzidos utilizou-se, ainda, soros de cães provenientes de um canil comercial localizado no Rio de Janeiro, RJ,suspeito de infecção brucélica pela ocorrência de abortos e natimortos. Houv