A rapid and sensitive diagnosis of bovine leukaemia virus infection using the nested shuttle polymerase chain reaction

T.) González, EsterNorimine, JunzoR. Valera, AlejandroTravería, GabrielA.) Oliva, GracielaE.) Etcheverrigaray, María

O Vírus da leucemia bovina (BLV) é o agente causal da Leucose Enzoótica Bovina (EBL). Na Argentina, iniciou-se um programa de erradicação da EBL. Neste estágio, é prioritário possuir uma ferramenta de diagnóstico confiável. Embora seja indiscutível a importância do teste de agar gel imunodifusão, empregado rotineiramente no diagnóstico serológico da EBL, faz-se necessária uma técnica de diagnóstico adicional capaz de confirmar os resultados duvidosos. Foi possivel detectar ADN proviral aplicando Nested-PCR em novilhos experimentalmente infectados com pequenas doses de sangue total (5ml) obtidas de um bovino BLV soropositivo. Esta técnica, cujo procedimento leva 3 horas, demonstrou ser muito sensível, uma vez que foi capaz de detectar a presença do provirus duas semanas após a inoculação. Os primers utilizados são os que detectam uma porção do genoma viral que geralmente é usado para diferenciar os tipos de BLV, utilizando a digestão com BamHI. Sugerimos que este método possa ser um instrumento válido para o diagnóstico precoce da infeção pelo BLV.

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2. Nested-PCR
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6. Nested­PCR