DNA fragmentation and membrane damage of bocachico Prochilodus magdalenae (Ostariophysi: Prochilodontidae) sperm following cryopreservation with dimethylsulfoxide and glucose
Martínez, José GregorioGarcía, Víctor AtencioCarrasco, Sandra Pardo
O curimba Prochilodus magdalenae, é uma espécie nativa de água doce da Colômbia ameaçada de extinção, sendo a mais capturada localmente e uma das mais importantes para a conservação ex-situ (bancos de germoplasma). O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de três concentrações de dimetilsulfóxido (DMSO) (5%, 10%, 15%) e três de glicose (305, 333, 361 mM) no diluente sobre a fragmentação do ADN espermático (F-DNA) (através de Halomax®, dispersão da cromatina) e danos em membrana (D-Me) (através da coloração eosina-nigrosina). Depois de avaliar a qualidade espermática por análise computacional da mobilidade, uma parte do sêmen dos machos foi diluída separadamente com três partes do diluente e colocado dentro de canudos de 0.5 ml. O congelamento foi feito em tanque de vapores secos de nitrogênio líquido por 30 minutos e descongelado a 60ºC por 8 segundos em banho de água e avaliada a percentagem de células com F-DNA e D-Me. Os resultados demonstraram que a criopreservação causa grande F-DNA (13.62 ± 1.6% até 28.91 ± 3.25) e D-Me (24.27 ± 1.1% até 58.33 ± 2.81%) quando comparada com o sêmen pré-congelamento (PFS) (6.71 ± 1.54% e 2.34 ± 0.5%, respectivamente para F-DNA e D-Me). Uma interação significativa foi encontrada entre a concentração de DMSO e glicose neste experimento. O uso dos diluentes 10% DMSO + 305 mM glicose + 12% gema de ovo de galinha e 10% DMSO + 333 mM glicose + 12% gema de ovo de galinha permitem obter a menor F-DNA e D-Me durante a criopreservação do sêmen de curimba. Uma alta correlação entre F-DNA e D-Me foi encontrada (r = 0.771).(AU)
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