Identificação de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia em aves de postura e matrizes comerciais pela técnica de hibridização fluorescente in situ (FISH) em tecidos incluídos em parafina
Gruchouskei, LeonardoPiccoli, Ronaldo JoséStreauslin, Jessica SantosCavasin, João PedroMatos, Mônica Regina deFaccin, MayaneViott, Aline de Marco
Bactérias do gênero Brachyspira podem ocasionar enfermidades entéricas em aves, assim o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da técnica de hibridização fluorescente in situ (FISH) para a identificação de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia utilizando amostras de ceco de aves de postura e matrizes comerciais fixados em formol. Foram coletadas amostras de 112 aves entre granjas de postura comercial e granjas de matrizes de corte com idade entre 35 e 82 semanas. Para avaliação, primeiramente procedeu-se ao isolamento bacteriano a partir das fezes. As amostras positivas foram submetidas a qPCR para identificação de espécies patogênicas. Posteriormente, segmentos formolizados de ceco dessas mesmas aves, foram processados pela técnica de FISH utilizando sondas marcadas de Brachyspira pilosicoli, Brachyspira hyodysenteriae e Brachyspira intermedia. Das 112 amostras foram obtidos 40 isolamentos característicos de Brachyspira e destes, na qPCR, 14 identificadas como B. hyodysenteriae e sete como B. intermedia, duas amostras foram positivas para ambas e 21 não foram caracterizadas. Na técnica de FISH, 52 amostras foram positivas para Brachyspira sp., 22 para B. hyodysenteriae, 28 para B. intermedia, sete para B. pilosicoli e oito amostras foram positivas para duas espécies. A avaliação estatística revelou que a técnica de FISH foi capaz de indicar maior número de aves positivas quando comparada ao isolamento bacteriano seguido por qPCR, inclusive revelando aves positivas para B. pilosicoli que não tinham sido identificados anteriormente. Dessa forma, conclui-se que a técnica de FISH apresentou-se eficiente para identificação das Brachyspiras avaliadas, servindo assim como uma ferramenta rápida e eficiente para o diagnóstico.
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