Ausência de correlação entre espécies de microfungos e método de controle químico de Atta tratadas com iscas tóxicas
Barbosa, Marcílio SouzaBarbosa, Suzanne NunesNagamoto, Nilson SatoruForti, Luiz Carloslmeida, Cícero
Atta sexdens rubropilosa (cortadeira de folha) possui associação simbiótica com fungos e interação negativa com outros fungos devido ao parasitismo do fungo cultivado pelas formigas. Quando colônias da formiga cortadeira de folhas são submetidas ao tratamento com iscas tóxicas, diversas espécies de fungos surgem dentro da colônia, podendo contribuir com a morte ou sobrevivência da colônia. Para entender os relacionamentos ecológicos em colônias de formigas, a identificação de espécie de fungos se torna muito importante e, o uso de DNA barcoding tem sido um método rápido e eficiente para identificação de espécies usando métodos moleculares. No presente trabalho, usamos a região ITS (internal transcribed spacer) para identificar fungos em colônias tratadas com iscas tóxicas. Dois experimentos com iscas tóxicas foram aplicados: 0.75g de Fipronil [0.003%] e 0.75g de Sulfluramid [0.3%]. As amostras, contendo os possíveis fungos, foram coletadas e cultivadas em meio Czaped durante sete dias para o crescimento do fungo e posterior identificação. O DNA total foi isolado de 100-150mg de micélio usando o método CTAB, usado para amplificar a região ITS por PCR empregando primers universais (ITS5 e ITS4). O sequenciamento foi realizado utilizando o método de Sanger. As sequências foram submetidas ao BLAST, permitindo identificar nove diferentes espécies das ordens Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales e Tremellales, mostrando variação 96-100% de identidade. Empregando a análise "The Automatic Barcode Gap Discovery", identificou-se nove grupos, correspondendo as espécies descritas no NCBI. As distâncias K2P foram usadas para gerar uma árvore usando Neighbour-Joining, apresentando que as espécies foram agrupadas de acordo com as filogenias dos grupos. Conclui-se que as colônias de formigas cortadeira de folhas apresentam grande diversidade de fungos e que DNA barcoding é eficiente para identificação destes.(AU)
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