False positive reaction due to endogenous biotin activity in glandular epithelium of decidua

Spano, Liliana CruzVargas, Paulo Roberto Mercon deLeite, José Paulo GagliardiNascimento, Jussara Pereira do

Sondas marcadas com biotina foram utilizadas neste trabalho para deteccão de infeccão viral por hibridizacão in situ em tecidos fixados com formalina e embebidos em parafina de 11 casos obtidos de abortamento. Sondas para citomegalovírus humano (HCMV), parvovírus B19 humano (B19) e adenovírus humano tipo 2 (HAd2), foram marcadas com biotina-11-dUTP através da reacão de nick-translation. Estreptavidina conjugada com fosfatase alcalina (SAP) seguida por solucão de 4-nitro-azul de tetrazolio/5-bromo-4-cloro-3-indolil fosfato (NBT/BCIP) foram utilizadas para deteccão da biotina após a reacão de hibridizacão. Reacão positiva foi observada no núcleo de células do epitélio glandular da decídua tanto no controle positivo quanto no negativo em tecidos de primeiro e segundo trimestre gestacional. Esta reacão não foi inibida com solucão bloqueadora da atividade endógena de fosfatase alcalina e persistiu mesmo com a omissão das sondas. O uso de controles negativos permitiu revelar atividade endógena de biotina nuclear em epitélio glandular da decídua, responsável por reacões falso positivas em sistemas de deteccão estreptavidina-biotina (StrepABC). Os resultados obtidos neste estudo fortemente recomendam que a deteccão de ADN por hibridizacão in situ em endométrio gestacional seja feita com outro sistema de deteccão que não o StrepABC.