Use of photocatalytic reduction to hasten preparation of culture media for saccharolytic Clostridium species
S. Fukushima, RomualdoJ. Weimer, PaulA. Kunz, Daniel
A cisteína é o agente redutor preferido para o preparo de meios de cultura para muitos microrganismos estritamente anaeróbicos; no entanto, a ação redutora do potencial redox da cisteína é muito lenta, tornando-a inconveniente, para o uso imediato do meio ou em grande quantidade. O tempo requerido para reduzir o meio de cultura contendo resazurina (um indicador redox) foi bastante encurtado quando o meio, após ter sido injetado com o agente redutor cisteína, foi irradiado com luz incandescente proveniente de duas lâmpadas de halogênio. A intensidade da iluminação afetou o tempo gasto na redução: tubos mantidos no escuro alcançaram o nível desejado de anaerobiose (medido espectrofotometricamente pela descoloração do indicador, a resazurina) somente após 12 h, enquanto os tubos mantidos sob iluminação, encontrada em um laboratório comum, levaram cerca de 2 h. Por outro lado, os tubos irradiados com máxima intensidade de luz (equivalente a uma lâmpada normal de 100 watt) tornaram-se totalmente incolores em menos de 20 min. A cisteína mostrou-se ser um reagente indispensável para que a redução da resazurina ocorresse. Evidências de que a anaerobiose do meio de cultura, acelerada pela alta irradiação de luz artificial, foi alcançada, foram fornecidas pelo fato de que quatro cepas de Clostridium e uma de Thermoanaerobacter mostraram crescimento similar (medido através de tempo de duração da fase lag, velocidade de crescimento e crescimento máximo) em meio de cultura reduzido através de exposição a alta intensidade luminosa ou em meio preparado de maneira convencional.
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