Isolamento, caracterização morfofisiológica e molecular, análise filogenética de Trichoderma asperellum em Bangladesh
Uddin, S. AHossain, IMahmud, HMonjil, M. SHossain, M. D
A experiência foi conduzida no Departamento de Fitopatologia da Universidade Agrícola de Bangladesh, Mymensingh, para identificar Trichoderma asperellum em um programa de rastreio em nível nacional e para avaliar o seu efeito antagônico contra vários agentes patogénicos transmitidos pelo solo. Amostras foram coletadas do solo da rizosfera de 49 culturas diferentes em 107 locais diferentes em Bangladesh, especialmente considerando os diversos isolados de T. asperellum para purificação. Com base nas características morfológicas e fisiológicas, foram selecionados quinze isolados. Destes, os isolados de TR27 e TR45 foram cultivados e esporulados a 40 °C, exceto todos os isolados com 35 °C, e particularmente mostrando uma diminuição do crescimento micelial em todos os isolados para o aumento do pH. Enquanto isso, T. asperellum apresentou efeitos antagônicos significativos contra Fusarium oxysporum, Sclerotium rolfsii e Pythium aphanidermatum, resultando na redução da podridão do pé e da raiz, podridão do colo e doenças de amortecimento, respectivamente. Quatro isolados foram selecionados para caracterização molecular entre 15 isolados em termos de maior crescimento micelial e densidade de esporos em condições in vitro, isolados de (TR27) Sadar, Moulvibazar (arroz), (TR45) Sadar, Mymensingh (cabaça doce), (TR70) Chapra, Chapai Nawabganj (gergelim) e (TR85) Nayanpur, Lalmonirhat (milho) foram estudados na região ITS e TEF. Isolados de TR45, TR70 e TR85 foram observados com 98% de homologia, e TR27 exibiu 88% em seus respectivos isolados mais próximos nas sequências ITS. Os isolados de TR27 e TR85 também exerceram sua respectiva homologia mais próxima (96%), enquanto TR45 apresentou 99% e 93% de homologia com TR70 em sequências de TEF. Os isolados TR45, TR70 e TR85 foram evidentemente determinados como T. asperellum com 100% de valor de bootstrap, e o isolado TR27 também foi reconhecido com 72% de valor de bootstrap na árvore filogenética. Entretanto, efeitos complementares de homologia superior significativa e maior valor de bootstrap na identificação de T. asperellum foram considerados dignos de nota. Na análise filogenética, foi observada uma diferenciação magnífica entre os isolados de Trichoderma dentro e entre os grupos de espécies intimamente relacionadas na região Tef1, refletindo a variabilidade máxima nos isolados de rDNA na região ITS, ao mesmo tempo que demonstrava uma maior taxa de transversão e divergência evolutiva.
Texto completo