Flow cytometry as a tool in the evaluation of blood leukocyte function in Chelonia mydas (Linnaeus, 1758) (Testudines, Cheloniidae)
Rossi, S.Sá-Rocha, VM.Kinoshita, D.Genoy-Puerto, A.Zwarg, T.Werneck, MR.Sá-Rocha, LC.Matushima, ER.
Chelonia mydas é uma tartaruga marinha que freqüenta o litoral brasileiro para alimentação e nidificação e uma doença denominada fibropapilomatose é uma das mais importantes ameaças à sobrevivência dessa espécie. Desta forma, a definição de uma metodologia que permita analisar a função dos leucócitos sangüíneos torna-se extremamente necessária. Foram utilizadas amostras sangüíneas de C. mydas com e sem fibropapilomas capturadas no litoral norte do estado de São Paulo. As amostras sangüíneas foram colocadas em tubos contendo heparina sódica e transportadas em meio de cultura celular RPMI 1640 estéril e sob refrigeração. Os leucócitos foram obtidos por gradiente de densidade usando Ficoll-PaqueTM Plus, Amershan Biociences®. Os estímulos aplicados foram Miristato Acetato de Phorbol (PMA) para avaliação de burst oxidativo e Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, Alexa Fluor® 594 conjugate para avaliação de fagocitose. Foram identificadas três populações celulares: heterófilos, monócitos e linfócitos. Os monócitos foram as células responsáveis pela fagocitose e pelo burst oxidativo.
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