Direct application of the new pcr protocol for evaluation and monitoring of bombyx mori infection by nucleopolyhedrovirus

Ikuno, A.A.Margatho, L.F.F.Harakava, R.Akamatsu, M.A.Martins, E.M.F.Porto, A.J.Ferreira, V.C.A.

^aRESUMO A reação em cadeia pela polimerase (PCR) com primers complementares a uma região do gene da poliedrina foi usada para diagnosticar a infecção de B. mori pelo vírus da nucleopoliedrose (BmNPV). Infecções experimentais foram realizadas para a padronização do ensaio de PCR. Os produtos de PCR foram seqüenciados e a especificidade da amplificação foi confirmada por comparação com seqüências de nucleotídeos do BmNPV disponível no GenBank. Um grau de identidade ao redor de 99% foi observado quando tais produtos de PCR foram comparados com as seqüências de BmNPV conhecidas. O protocolo de amplificação do fragmento gênico viral proposto aqui é útil para o diagnóstico precoce da nucleopoliedrose na larva total, hemolinfa e ovos infectados ou em insetos assintomáticos. Além disso, o ensaio de PCR padronizado pode ser empregado como uma ferramenta para a vigilância e controle da nucleopoliedrose em criações de bicho-da-seda.^lpt