Production of monoclonal antibodies against conserved components of infectious bronchitis virus
Souza, C.M.Rocha, F.R.T.Martins, N.R.S.Resende, J.S.Jorge, M.A.Rampinelli, A.P.
Foram produzidos anticorpos monoclonais (AcM) da subclasse IgG1 contra as proteínas N (53KDa) e S2 (82KDa) do vírus da bronquite infecciosa das galinhas (VBIG) amostra M41. Os híbridos secretores originaram-se da fusão entre células de mielomas da linhagem Sp2/0-Ag14 e linfócitos B de camundongos Balb/c previamente imunizados com o vírus completo. O primeiro critério de seleção foi por ELISA, no qual 36 híbridos originados de duas fusões reagiram positivamente; destes, foram selecionados dois AcM que reagiram contra as proteínas N (N3D4) e S2 (S12B2) do VBIG da amostra M41 (sorotipo Massachusetts) no western blotting. Os mesmos AcM foram também capazes de reconhecer as estirpes Ark-99 (sorotipo Arkansas) e A5968 (sorotipo Connecticut) do VBIG no western blotting. No ELISA, o AcM contra S2 (S12b2) reconheceu 11 estirpes das 11 estudadas (M41, SE-17, H52, 297, 283, PM-1, PM-2, PM-3, 351, 29-78 E 327), enquanto o AcM contra a proteína N reconheceu apenas seis estirpes (M41, SE-17, H52, 283, 327 e 297). O anticorpo monoclonal contra S2 comportou-se como uma boa ferramenta de diagnóstico do VBIG, independentemente do sorotipo que pode ser aplicado em ensaios de rotina laboratorial, especialmente no diagnóstico das doenças que se confundem com a BIG nas galinhas, enquanto o AcM contra N (N3F10) demonstrou reconhecer uma região menos conservada entre as estirpes de VBIG e pode ser útil em estudos comparativos entre isolados de VBIG.
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